REDA: reproducción y daño

Título del Proyecto: Validación de proteínas relacionadas con la calidad seminal presentes en prostasomas aislados de plasma seminal humano

Descripción del proyecto:

Los prostasomas, son vesículas extracelulares que contienen cargos específicos de proteína, mARN, miRNA y DNA que pueden ser transferidos al espermatozoide. La mayoría de estudios se han realizado con el plasma sanguíneo y la orina para buscar marcadores asociados sobre todo a cáncer de próstata. En este estudio nos vamos a centrar en el semen como fuente de prostasomas. En nuestro grupo recientemente se ha establecido el proteoma de individuos normoespérmicos y no-normoespérmicos, en el que la composición proteica es bastante estable. Las diferencias encontradas se asocian más al nivel de expresión. Por ello el objetivo principal de este proyecto sería confirmar proteínas diferencialmente expresadas obtenidas en el análisis proteómico llevado a cabo mediante iTRAQ. Para ello se evaluaran los niveles de expresión para 7 proteínas que están implicadas en la producción de energía en el espermatozoide. Se estudiaran en muestras seminales de varones de clínicas de fertilidad y también en muestras de pacientes con problemas de próstata para ver como cambiaría esta composición proteica a nivel de prostasomas, plasma seminal y espermatozoides.

Objetivos específicos:

-Aislar prostasomas de pacientes con problemas prostáticos para comparar los niveles de proteínas detectados entre normoespérmicos y no normoespérmicos.

-Valorar las características seminales de las muestras utilizadas mediante los parámetros propios del seminograma

-Determinar otros parámetros no incluidos en las evaluaciones rutinarias de las clínicas de fertilidad como son: los niveles de estrés oxidativo, capacidad antioxidante y fragmentación del DNA espermático.

-Establecer las condiciones para evaluar mediante western blot e inmunohistoquimica los niveles de las proteínas seleccionadas para validación.

-Relacionar estadísticamente los niveles de expresión de los biomarcadores estudiados con parámetros relacionados con la calidad seminal.

Interesados contactar con Rosa Roy

rosa.roy@uam.es

Departamento de Biología

UAM.