Microdominios de membrana y su relevancia en adhesión, migración y vesículas extracelulares
La secreción de vesículas extracelulares supone un novedoso mecanismo de comunicación entre células de organismos pluricelulares. Todas las células son capaces de secretar distintos tipos de vesículas que portan material genético (mRNA, miRNA) y otras moléculas bioactivas, y que son captadas por células del entorno más o menos cercano modificando su comportamiento. La abundancia de dichas vesículas en distintos biofluídos corporales (sangre, orina, semen, saliva, leche, etc) las hacen muy atractivas como posibles biomarcadores no invasivos del estado de salud general del organismo. Sin embargo, todavía se desconocen muchos de los mecanismos moleculares que dictan su biogénesis, la selección de su cargo o su captación. En el grupo estudiamos la función de proteínas de la superfamilia de las tetraspaninas, que por su capacidad de formar microdominios de membrana y de adoptar una estructura tridimensional cónica, están ampliamente enriquecidas en vesículas extracelulares. En este trabajo nos centraremos en estudiar los mecanismos de captación de vesículas extracelulares por parte de la célula diana mediante un abordaje Genome-Wide CRISPR y su validación con un sistema recientemente descrito por el grupo basado en un reportero con actividad luciferasa que nos permite seguir el proceso de captación de forma dinámica y cuantitativa.
Competencias:
- Transfección de células eucariotas
- Aislamiento de exosomas y caracterización de los mismos
- Ensayos de captación de vesículas in vitro
- Análisis bioinformático de resultados de secuenciación masiva